当前位置:首页 > 技术详情

正相色谱和反相色谱的区别

在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如醇、乙腈等),以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值,随其极性的增加而增大,但随流动相中极性调节剂的极性增大(或浓度增大)而降低。同时,极性键合相的极性越大,组分的保留值越大。该法主要用于分离异构体,极性不同的化合物,特别是用来分离不同类型的化合物。

在反相色谱中,一般采用非极性键合固定相,如硅胶-C18H37(简称ODS或C18)硅胶-苯基等,用强极性的溶剂为流动相,如甲醇/水,乙腈/水,水和无机盐的缓冲液等。

正相色谱和反相色谱的区别:
 
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。
1、正相色谱 
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。  由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。  
2、反相色谱 
反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
上海嘉鹏科技有限公司专业生产:紫外分析仪三用紫外分析仪暗箱式紫外分析仪暗箱三用紫外分析仪暗箱紫外分析仪手提式紫外分析仪、三用紫外分析仪暗箱式、紫外检测仪、部分收集器、恒流泵、蠕动泵、凝胶成像系统凝胶成像分析系统化学发光成像分析系统、光化学反应仪旋涡混合器、漩涡混合器、玻璃层析柱、梯度混合器、梯度混合仪、核酸蛋白检测仪、玻璃层析柱、荧光增白剂测定仪、馏分收集器、切胶仪、蓝光切胶仪层析系统等产品。欢迎来电咨询。

上海嘉鹏科技有限公司 www.shjpkj.cn
电话:021-66030766   36162366 
400免费咨询电话:4000-123-925  
手机:13585698333  18918199710  13501668369  
企业QQ,2880150292,2880150293,2880150290,2880150297
Copyright@ 2003-2024  上海金鹏分析仪器有限公司版权所有   电话:021-36162366/66030766/400免费咨询电话:4000-123-925,企业邮箱:sales@shjpkj.com,jp17@vip.qq.com 传真:021-36162369 地址:上海市真陈路1398弄15号 邮编:200444
       沪ICP备09005501号-5